DNA連接酶的銜接物連接法介紹
所謂銜接物（linker），是指用化學方法合成的一段由10～12個核苷酸組成、具有一個或數(shù)個限制酶識別位點的平末端的雙鏈寡核苷酸短片段。銜接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶處理使之磷酸化，然后再通過T4DNA連接酶的作用使兩者連接起來。接著用適當?shù)南拗泼赶咩暯游锏腄NA分子和克隆載體分子，這樣的結(jié)果使二者都產(chǎn)生出了彼此互補的粘性末端。于是我們便可以按照常規(guī)的粘性末端連接法，將待克隆的DNA片段同載體分子連接起來。
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