流式圖四個(gè)象限怎么看凋亡
流式圖四個(gè)象限看凋亡：在二維散點(diǎn)圖上，PI 和 annexin V 分別是X和Y軸。一般認(rèn)為PI單染的細(xì)胞是已經(jīng)死亡的細(xì)胞，annexin V 單染的細(xì)胞是凋亡早期的細(xì)胞，而雙染是凋亡中期的。
需要在散點(diǎn)圖上先畫出4個(gè)象限，位置根據(jù)無染色的陰性細(xì)胞先定出左下象限。Annexin V是一種檢測(cè)細(xì)胞凋亡的試劑，在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。
相關(guān)分析
使用流式細(xì)胞儀正確分析Annexin V-FITC/PI雙染的細(xì)胞前要求儀器的熒光補(bǔ)償來去除兩種染料激發(fā)光之間的疊加。因?yàn)闊晒庋a(bǔ)償設(shè)置與PMT的電壓直接相關(guān)，所以不同儀器之間的補(bǔ)償不同。建議在實(shí)驗(yàn)開始階段分析經(jīng)Annexin V、PI分別單染的細(xì)胞來調(diào)整熒光補(bǔ)償去除光譜重疊。根據(jù)未處理細(xì)胞空白對(duì)照和經(jīng)Annexin V、PI分別細(xì)胞染色后的單染對(duì)照的分析設(shè)定十字門的位置。
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