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用小型串聯(lián)式過濾器滅菌過濾

2019.11.12
實(shí)驗(yàn)材料

待滅菌培養(yǎng)基 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

儀器、耗材

串聯(lián)式過濾器 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?培養(yǎng)基瓶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?蓋子 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?容器 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?蠕動(dòng)泵 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?硅樹脂管 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?架子 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

實(shí)驗(yàn)步驟1. 將管（硅樹脂管，與蠕動(dòng)泵相配，接至濾器接口）與蠕動(dòng)泵（最好有底部開關(guān)）相連。

2. 將上游端插入待過濾的培養(yǎng)基中。

3. 打開過濾器包裝，與蠕動(dòng)泵出口相連。

4. 將過濾器（帶罩的串聯(lián)式過濾器）夾在架子（固定濾器）的合適高度，使收集培養(yǎng)基的瓶子（有刻度的培養(yǎng)基瓶，鋁箔包裹，干熱法滅菌）正好位于過濾器的下方，瓶頸可被蓋住，并且當(dāng)裝滿的時(shí)候可以很容易地將瓶子取出。如果需要，可先用一個(gè)無菌培養(yǎng)瓶進(jìn)行調(diào)試，但最后不要用這個(gè)瓶子收集無菌的液體。

5. 打開泵，收集約 20 ml 于瓶中用于調(diào)試。

6. 取出調(diào)試的瓶子（高溫高壓滅菌），蓋上蓋，標(biāo)記上“1”。

7. 將第一個(gè)培養(yǎng)基瓶的鋁箔拿掉，放在過濾鐘罩下。

8. 打開泵。

9. 灌入瓶中至 100 ml。

10. 關(guān)閉泵。

11. 將瓶子取出、蓋好、編號(hào)，換一個(gè)新的無菌培養(yǎng)基瓶。

12. 重復(fù)步驟 7~11，在 5 個(gè)瓶子中各裝 100 ml，剩余的收集在最后一個(gè)瓶子中。

13. 在每個(gè)瓶子的上部空間充 5% CO2 氣體。

14. 將鋁箔重新包在蓋子上，包到瓶頸處以保證保存時(shí)無塵。

15. 在瓶子上貼標(biāo)簽，標(biāo)注日期，簽名。

16. 將裝有 100 ml 培養(yǎng)基的瓶子保存于 4°C 。

17. 將第一個(gè)和最后一個(gè)瓶子蓋好置于 37°C , 孵育一周。

18. 將培養(yǎng)基存放于 4°C ，無菌檢測完成之前不要使用。如果在檢測樣品中發(fā)現(xiàn)污染，則整批培養(yǎng)基要重新過濾或棄去。


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