蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定方法
1 ???試劑與材料
除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和GB/T?6682規(guī)定的一級(jí)水。
1.1???乙腈。
1.2???丙酮，重蒸。
1.3???甲醇，色譜純。
1.4???氯化鈉，140℃?烘烤4?h。
1.5???柱后衍生試劑，試劑包（P/N：YS-CB-001）
1.5.1????0.05mol/L?NaOH?溶液：R315，以1?L水溶解。
1.5.2????OPA稀釋溶液：R312，以1?L水溶解。
1.5.3????領(lǐng)苯二甲醛（O-Phthaladehyde，OPA）：R301?。
1.5.4????疏基乙醇（Thiofluor）：R302?。
1.6????固相萃取柱，F(xiàn)J-NH2-500.6：氨基柱，容積6?mL，填充物?500mg?。
1.7????濾膜，0.2μm，0.45μm，溶劑膜。
1.8????農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品見表1
表1????10種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝物標(biāo)準(zhǔn)品
序號(hào) | 中文名 | 英文名 | 純度 | 溶劑 |
1 | 涕滅威亞砜 | aldicarb?sulfoxide | ≥96% | 甲醇 |
2 | 涕滅威砜 | aldicarb?sulfone | ≥96% | 甲醇 |
3 | 滅多威 | methomyl | ≥96% | 甲醇 |
4 | 3-羥基克百威 | 3-hydroxycarbofuran | ≥96% | 甲醇 |
5 | 涕滅威 | aldicarb | ≥96% | 甲醇 |
6 | 速滅威 | metolcarb | ≥96% | 甲醇 |
7 | 克百威 | carbofuran | ≥96% | 甲醇 |
8 | 甲萘威 | carbaryl | ≥96% | 甲醇 |
9 | 異丙威 | isoprocarb | ≥96% | 甲醇 |
10 | 仲丁威 | fenobucarb | ≥96% | 甲醇 |
1.9????農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
1.9.1??單個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，直接使用農(nóng)藥標(biāo)樣。（濃度為1000mg/L）
貯存在?-18℃以下冰箱中，使用時(shí)根據(jù)各農(nóng)藥在對應(yīng)檢測器上的響應(yīng)值，吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用甲醇稀釋配制成所需的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
1.9.2??農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液
根據(jù)各農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)值，逐一準(zhǔn)確吸取一定體積的單個(gè)農(nóng)藥儲(chǔ)備液，分別注入同一容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度配成農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，使用前用甲醇稀釋成所需質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
2????儀器設(shè)備
2.1?????液相色譜儀，梯度系統(tǒng)，配有熒光檢測器（FLD）。
2.2?????食品加工器。
2.3?????勻漿機(jī)。
2.4?????氮吹儀。
2.5?????柱后衍生系統(tǒng)：CoM6000PCR?雙柱后衍生系統(tǒng)
3????測定步驟
3.1?????試樣制備
同NY/T?761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯農(nóng)藥多殘留的測定》中第一部分的方法一。
3.2?????提取
同NY/T?761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯農(nóng)藥多殘留的測定》中第一部分的方法一。
3.3?????凈化
從100?mL?具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.00?mL?乙腈相溶液，放入150?mL?燒杯中，將燒杯放在80℃?水溶鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬?，將乙腈蒸發(fā)近干；加入2.0?mL?甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解殘?jiān)?，蓋上鋁箔，待凈化。
將氨基柱用4.0?mL?甲醇+二氯甲烷（1+99）預(yù)洗條件化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即加入上述待凈化溶液，用?15?mL?離心管收集洗脫液，用?2mL?甲醇+二氯甲烷（1+99）洗燒杯后過柱，并重復(fù)一次。將離心管置于氮吹儀上，水浴溫度50℃?，氮吹蒸發(fā)至近干，用甲醇準(zhǔn)確定容至?2.5?mL?。在混合器上混勻后，用0.2?μm?濾膜過濾，待測。
3.4????色譜參考條件
3.4.1??色譜柱
預(yù)柱：??C18預(yù)柱，600220；
分析柱：C42545，Comatex，C18-CB，5?μ?，250×4.6。
3.4.2??柱溫，42℃?。
3.4.3??熒光檢測器，λex330?nm，λem465?nm。
3.4.4??溶劑梯度與流速
溶劑梯度與流速見表二????????????????????????????????????????
表2????溶劑梯度與流速
時(shí)間? min | A：水?? % | B：甲醇/水=90/10 % | 流速 mL/min |
0 | 75 | 25 | 1.00 |
12 | 55 | 45 | 1.00 |
25 | 10 | 90 | 1.00 |
30 | 10 | 90 | 1.00 |
31 | 75 | 25 | 1.00 |
40 | 75 | 25 | 1.00 |
3.4.5?????柱后衍生
3.4.5.1??衍生劑1：（見試劑包使用說明），流速：0.5mL/min。
3.4.5.2??衍生劑2：（見試劑包使用說明），流速：0.5mL/min。
3.4.5.3??反應(yīng)器溫度
水解溫度：100℃；衍生溫度：40℃。
3.5?????色譜分析
分別吸取20.0?μL?標(biāo)準(zhǔn)混合溶液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以樣品溶液峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較定量。
