BZ010 -水稻Cry1Ac 基因序列定性PCR 檢測
BZ010 -水稻Cry1Ac 基因序列定性PCR 檢測試劑盒
包括100 個擴增反應所需的試劑
【試劑盒組成】
2 x 275 μl Cry1Ac 反應試劑 (Cry1Ac mastermix； -20oC 保存)
1 x 50 μl 陽性對照 (Positive control； -20oC 保存)
【保存條件】
1.反應試劑和陽性對照應儲存在 -20°C。保質(zhì)期標注在盒子上。
2.請分裝PCR 反應試劑，以避免重復冷凍和解凍。頻繁的解凍和冷凍可能導致成分失去活性。
3.使用前在冰上溶解各試劑并充分混合，不要旋渦振蕩含酶的擴增反應試劑。
【操作過程】
1．在冰上解凍PCR 反應試劑。
2．準備反應試劑：
3．加入適當份量的DNA 模版和雙蒸水。
每次PCR 檢測都應該設(shè)置陽性對照（2 μl）和陰性對照（2 μl 水）
每個檢測樣品應該設(shè)置兩個PCR 重復反應
為了驗證陰性實驗結(jié)果不是由于樣本中存有PCR 抑制物而導致PCR 呈陰性反應，建議在測試樣本中加1 μl 的陽性對照作為spiking 對照 (spiking control)，同時進行PCR 反應。
4．將準備好的PCR 管放置在PCR 儀中，按照特定循環(huán)條件運行。
5．實驗數(shù)據(jù)分析
PCR 的產(chǎn)物需要通過瓊脂糖凝膠電泳檢測。
產(chǎn)物長度: 1000 b.p.
陰性的實驗結(jié)果有幾個可能性：
本中不存在目的片段；
樣本中目的片段的量低于檢測值；
樣本中存有 PCR 抑制物。
Spiking 對照
試劑盒中設(shè)計spiking 對照 (spiking control) 是為了確定沒有發(fā)生PCR 抑制。如果樣本中加了陽性對照以后得出陰性結(jié)果，說明樣本中存在PCR 抑制物，那幺此次陰性的實驗結(jié)果就不能作為正確的結(jié)果，需要重新開始樣本核酸的提取和PCR 擴增。
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