通常來說，色譜分析過程是利用流動相中的樣品和固定相的結(jié)合-分離差異來使得分離物質(zhì)的目的達(dá)到。結(jié)合-分離過程會受到溫度的影響，因此溫度會對分析過程產(chǎn)生影響。柱溫的改變會影響分離度和峰形，然而影響不大。流動相的種類和流速，測定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)，固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)，填充狀況以及柱長等是對色譜柱分離度產(chǎn)生影響的主要因素。

　　1.載氣種類

　　有N2、H2、He、Ar等為常用的載氣。其中H2、He的分子量比較小，對分析速度的提高非常有利，然而濃度較高的介質(zhì)易在其間形成擴(kuò)散,對分離度產(chǎn)生影響，因此在實(shí)際測量中，通常都在介質(zhì)濃度較低的區(qū)域使用H2、He并且將其流速提高，使擴(kuò)散的影響減少。擴(kuò)散作用小是N2、Ar等分子量較大的氣體的優(yōu)點(diǎn)在柱中壓降大流速慢，也就是較長的分析周期是缺點(diǎn)。

　　2.載氣流速

　　介質(zhì)自身的特性(揮發(fā)性,極性等)和載氣的流速決定了介質(zhì)在固定相上的滯留時間，因此流速快慢直接對分離度產(chǎn)生影響。

　　3.進(jìn)樣時間和進(jìn)樣量

　　應(yīng)當(dāng)盡可能縮短進(jìn)樣時間，原則上，瞬間進(jìn)樣會使得分離度提高，進(jìn)樣量應(yīng)當(dāng)盡可能小，然而應(yīng)當(dāng)使得檢測器可以識別出來。

　　4.色譜長度和填料的性質(zhì)

　　越長的色譜柱，組分之間就會有越好的分辯效果，然而色譜柱越長壓降越大，但是輸入的壓力是有限的。如果色譜柱過長，那么會使得進(jìn)出口壓力比增大，從而使得分離度會降低。

　　5.色譜柱填料顆粒大小

　　色譜柱填料顆粒越細(xì),因?yàn)樵黾恿吮砻娣e，所以會有越好的分辨效果，然而，顆粒細(xì)會使得柱壓降增大，產(chǎn)生相反的效果。

　　6.柱溫

　　分辯效果也會受到柱溫的影響也較大。由于溫度，會降低氣體在固體表面的吸附程度或在液體中的溶解度。在氣液色譜分析中,當(dāng)超過一定的溫度的時候，在色譜柱中一般會有靜態(tài)的液體揮發(fā)掉,因此在選擇柱溫時，應(yīng)當(dāng)也需要對樣品的沸點(diǎn)有所考慮，通常比樣品沸點(diǎn)的平均值稍低。