一、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥概述

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是近年來發(fā)展較快的殺蟲劑,具有廣譜、高效、低毒、低殘留等特點(diǎn),其化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為2種:Ⅰ型不含氰基,如丙烯菊酯、聯(lián)苯菊酯等;Ⅱ型含氰基,如氯菊酯、溴菊酯、甲氰菊酯等。大多數(shù)農(nóng)藥為黏稠油狀液體,易溶于丙酮、石油醚等有機(jī)溶劑,難溶于水,在酸性溶液中穩(wěn)定,遇堿性易分解。

二、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的中毒特征

職業(yè)性擬除蟲菊酯急性中毒常系經(jīng)皮吸收和經(jīng)呼吸道入引起,主要表現(xiàn)為下列癥狀:

(1)皮膚和黏膜刺激? ? 多在接觸后4～6h出現(xiàn)流淚、眼痛、畏光、眼瞼紅腫、球結(jié)膜充血和水腫等,有的患者還可有呼吸道刺激癥狀。面部皮膚或其他暴露部位瘙癢感,并有蟻?zhàn)?、燒灼或緊麻感,亦可有粟粒樣丘疹或皰疹。

(2)全身癥狀? ??有頭暈、頭痛、惡心、食欲不振、乏力等,并可出現(xiàn)流涎、多汗、胸悶、精神萎靡等。較重者可出現(xiàn)嘔吐、煩躁、視物模糊、四肢肌束顫動(dòng)等,有些患者可有瞳孔縮小,但程度較急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒輕。部分患者體溫輕度升高,嚴(yán)重中毒者可因呼吸循環(huán)衰竭而死亡,目前無人類發(fā)生慢性中毒的證據(jù)。

除皮炎外,溴氰菊酯還可引起類似枯草熱的癥狀,也可誘發(fā)過敏性哮喘等。擬除蟲菊酯與其他農(nóng)藥混用時(shí),可產(chǎn)生增毒作用。臨床表現(xiàn)具有急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒和除蟲葡酯中毒的雙重特點(diǎn),但以有機(jī)磷農(nóng)藥中特征最為明顯,其比有機(jī)磷農(nóng)藥中毒急,且更易發(fā)生呼吸和循環(huán)衰竭。

大類食品中普遍存在有機(jī)氯農(nóng)藥殘留,特別是脂肪含量高的動(dòng)物性食品中蓄積較多的有機(jī)氯農(nóng)藥。這類農(nóng)藥通過食物鏈進(jìn)入人體被吸收后,呈現(xiàn)慢性、積蓄性毒性。因此,為了保證人類健康,就必須加強(qiáng)對(duì)食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)與監(jiān)督。該類農(nóng)藥主要污染農(nóng)產(chǎn)品,常采用氣相色譜法進(jìn)行測(cè)定。

三、大米中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定

1、儀器試劑

1)儀器

①氣相色譜儀:配有電子捕獲檢測(cè)器(ECD)。

②凝膠色譜儀。

③組織搗碎機(jī)。

④旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

⑤過濾器具:布氏漏斗、抽濾瓶。

⑥具塞錐形瓶:100mL。

⑦分液漏斗:250mL。

⑧色譜柱。

2)試劑

①丙酮:分析純,重蒸。

②石油醚:沸程60～90℃,重蒸。

③乙酸乙酯:分析純,重蒸。

④苯:重蒸。

⑤無水硫酸鈉:分析純,將無水硫酸鈉置干燥箱中120℃干燥4h,冷卻后,密閉保存。

⑥弗羅里硅土:于620℃灼燒4h后備用,用前于140℃烘2h,趁熱加5%水滅活。

⑦農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品:見表1。

⑧標(biāo)準(zhǔn)溶液:分別準(zhǔn)確稱取適量的每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品,用苯溶解并配制成濃度為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,使用時(shí)用石油醚稀釋配制成單品種的標(biāo)準(zhǔn)使用液。再根據(jù)各農(nóng)藥品種的儀器響應(yīng)情況,吸取不同量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用石油醚稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。

2、工作過程

1)試樣制備

取糧食試樣經(jīng)糧食粉碎機(jī)粉碎,過20目篩制成糧食試樣。

2)提取

糧食試樣:稱取10g糧食試樣,置于100mL具塞錐形瓶中,加入20mL石油醚,于電動(dòng)振蕩器上振蕩0.5h。

3)凈化與濃縮

色譜柱的制備:玻璃色譜柱中先加入1cm無水硫酸鈉,再加入5g 5%弗羅里硅土,最后加入1cm高無水硫酸鈉,輕輕敲實(shí),用20mL石油淋洗凈化柱,棄去淋洗液,柱面要留有少量的液體。

凈化與濃縮:準(zhǔn)確吸取試樣提取液2mL,加入已淋洗過的凈化柱中,用100mL石油醚-乙酸乙酯(95+5)洗脫,收集洗脫液于蒸餾瓶中,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干,用少量石油醚多次溶解殘?jiān)谥贫入x心管中,最終定容至1.0mL,供氣相色譜分析。

4)測(cè)定

用附有電子捕獲檢測(cè)器的氣相色譜儀測(cè)定。

色譜操作條件:石英彈性毛細(xì)管柱,0.25mm(內(nèi)徑)×15m,內(nèi)涂有OV-101固定液。

氣體流速:氮?dú)?0mL/min,尾吹氣60mL/min,分流比1:50。

溫度:柱溫自180℃升至230℃保持30min。

檢測(cè)器、進(jìn)樣溫度:250℃。

色譜分析:吸取1μL試樣液注人氣相色譜儀,記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰高。再吸取1μL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣,記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰高。根據(jù)組分在色譜上的出峰時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)組分比較定性,用外標(biāo)法與標(biāo)準(zhǔn)組分比較定量。

3、結(jié)果處理

以外標(biāo)法定量,按下式計(jì)算:

式中? ? X——樣品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留的含量,mg/kg;

? ? ? ? ? ?m_si——標(biāo)準(zhǔn)品中i組分農(nóng)藥的含量,ng;

? ? ? ? ? ?V₁——試樣進(jìn)樣量,μL;

? ? ? ? ? ?V₂——樣品的定容體積,mL;

? ? ? ? ? ?h_si——標(biāo)準(zhǔn)溶液中,組分農(nóng)藥的峰高,mm;

? ? ? ? ? ?hi——試樣中組分農(nóng)藥的峰高,mm;

? ? ? ? ? ?m一一樣品質(zhì)量,g;

? ? ? ? ? ?K——稀釋倍數(shù)。

? ? ? ?保留兩位有效數(shù)字。

4、注意事項(xiàng)

(1)擬除蟲菊酯類農(nóng)藥測(cè)定原理? ? 試樣用水-丙酮均質(zhì)提取,經(jīng)二氯甲烷液-液分配,以凝膠色譜柱凈化,再經(jīng)活性炭固相柱凈化,洗脫液濃縮井溶解定容后,供氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)測(cè)定和確證,外標(biāo)法定量。

(2)有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定原理? ? 樣品中有機(jī)氯農(nóng)藥經(jīng)有機(jī)溶劑提取、純化與濃縮后,注人氣相色譜。樣品在汽化室被汽化,在一定的溫度下,汽化的樣品隨載氣通過色譜柱,由于樣品中阻分與固定相間相互作用的強(qiáng)弱不同而被逐一分離,當(dāng)?shù)竭_(dá)電子捕獲檢測(cè)器時(shí),親電型強(qiáng)的組分對(duì)檢測(cè)器發(fā)出的恒定β射線中的一定能量的電子產(chǎn)生,從而使電流減弱,產(chǎn)生可檢測(cè)的電信號(hào),根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間定性,外標(biāo)法定量。

(3)樣品處理? ? 取糧食試樣經(jīng)糧食粉碎機(jī)粉碎,20目篩制成糧食試樣:稱取10g食試樣,置于100mL具塞錐形瓶中,加入20mL石油醚,于電動(dòng)振蕩器上振蕩0.5h。

蔬菜試樣洗凈,去掉非可食那分后備用:稱取20g經(jīng)處理蔬菜試樣,置于組織碎杯中,加入丙酮和石油各30mL,于搗碎機(jī)上搗碎2min,搗碎液經(jīng)抽濾,濾液移入250mL分液漏斗中,加入100mL 20g/L硫酸鈉水溶液,充分搖勻,靜置分層,將下層溶液轉(zhuǎn)移到另一250mL分液漏斗中,用20mL石油醚萃取一次,再用20mL石油醚萃取一次,合并三次萃取的石油醚層,過無水硫酸鈉層,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至10mL。