植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法原理：在強(qiáng)酸條件下NO3－與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸。生成的硝基水楊酸在堿性條件下（pH＞12）呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色的深淺與含量成正比，可直接用分光光度計(jì)測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)步驟：一、材料儀器設(shè)備及試劑
1. 材料：小麥或水稻等植物的葉片；
2. 儀器設(shè)備：分光光度計(jì)；電子分析天平；10ml、20ml刻度試管；移液管；25ml容量瓶；小漏斗（ф5cm）；玻棒；洗耳球；電爐；鋁鍋；玻璃泡；13.7cm定量濾紙若干。
3. 試劑及配制
10μg·ml－1
NO3―-N標(biāo)準(zhǔn)母液配制：精確稱(chēng)取烘至恒重的KNO30.1444g，溶于蒸餾水中，定容至200ml（即為100μg·ml－1
NO3―-N溶液）。然后再吸取該溶液10ml，加蒸餾水稀釋至100ml，即為10μg·ml－1 的NO3―-N標(biāo)準(zhǔn)液。
5％水楊酸-硫酸溶液配制：稱(chēng)取5g水楊酸先加少量濃硫酸（密度為1.84）溶解后，再加濃硫酸定容至100ml，搖勻，貯于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。
8％氫氧化鈉溶液配制：稱(chēng)取20g氫氧化鈉溶于250ml蒸餾水中。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.? NO3―-N標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作
（1）
取6支10ml刻度試管，編號(hào)，按下表配制每管含量為0～10μg的NO3―-N標(biāo)準(zhǔn)液。加入表中試劑后，搖勻。在室溫下放置20min后，每管再加入8.6ml
8﹪NaOH溶液，搖勻，使使顯色液總體積為10ml。然后以0號(hào)管為空白對(duì)照，在410nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值。
（2） 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制
以1～5號(hào)管的NO3―-N含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2. 樣品中硝酸鹽的測(cè)定
（1）樣品液的制備
取一定量的植物葉片剪碎混勻，稱(chēng)取2～3g（三份），分別放入三支20ml刻度試管中，加入10ml蒸餾水，用玻璃泡封口，置于沸水浴中提取30min。到時(shí)間后取出，用自來(lái)水冷卻，將提取液過(guò)濾到25ml容量瓶中，并用蒸餾水反復(fù)沖洗殘?jiān)?，最后定容至刻度?br>
（2）樣品液的測(cè)定
取三支10ml刻度試管，分別加入樣品液0.1ml，蒸餾水0.9ml,
5％水楊酸-硫酸溶液0.4ml，混勻后置室溫下20min，再慢慢加入8.6ml
8％NaOH溶液，搖勻，使顯色總體積為10ml，待冷卻至室溫后，以標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)0號(hào)管作空白對(duì)照 ，在410m波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值。
三、結(jié)果計(jì)算
根據(jù)樣品液所測(cè)得的吸光度（A）值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出NO3―-N的含量，按下式計(jì)算樣品中NO3―－N含量。
