冷凍電鏡低劑量電子冷凍成像
低劑量電子冷凍成像
材料汪都知道一般做TEM、SEM的時候,樣品導(dǎo)電性越好,電子劑量越高,成像質(zhì)量越好。然而,高劑量電子對生物大分子卻是毀滅性的,因此Richard Henderson教授提出在低溫下用盡量低的電子劑量成像。他與其合作者先后在1975年和1990年重構(gòu)出了粗糙的(7?)和高分辨率(3.5?)的細(xì)菌視紫紅質(zhì)蛋白的模型,如圖4所示,證明了冷凍電鏡用于生物大分子高分辨率結(jié)構(gòu)解析的可行性。然而,這個歷時15年的進(jìn)步與早在1984年就獲得膜蛋白3.0 ?分辨率原子模型的Hartmut Michel等人(1988年諾貝爾化學(xué)獎獲得者)相比似乎仍顯遜色。盡管情況不容樂觀,但是Henderson教授仍不斷從理論上指導(dǎo)冷凍電鏡技術(shù)的發(fā)展并預(yù)言:隨著電鏡技術(shù)和制樣水平的發(fā)展,冷凍電鏡必將成為疑難樣品和非結(jié)晶生物大分子結(jié)構(gòu)解析的有力工具。
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