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免疫學實驗--凝集實驗介紹

2022.2.10

凝集實驗介紹:

  凝集實驗是血清學試驗方法中的一種,血清學試驗是抗原抗體在體外出現(xiàn)可見反應的總稱,故又稱抗原抗體反應。它可以用已知抗體(細菌抗血清)檢測未知抗原(待檢細菌);也可用已知抗原(已知病原菌)檢測患者血清中的相應抗體及其效價,是臨床診斷、實驗室研究和細菌學鑒定的重要手段之一。

凝集實驗正常值:

  體內(nèi)菌群的種類和比例正常,人體處于動態(tài)平衡健康狀態(tài)。

凝集實驗臨床意義:

  用于鑒定菌種及菌型,葡萄球菌、肺炎鏈球菌、沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸埃希菌、霍亂弧菌、腦膜炎奈瑟菌等。
  異常結果:肺炎鏈球菌:引起大葉性肺炎等疾病;腦膜炎奈瑟菌引起的腦膜炎;致病性大腸埃希菌引起的各種腸道疾病;葡萄球菌引起的;沙門菌屬引起的;志賀菌屬引起的;霍亂弧菌引起的。
  需要檢查的人群:葡萄球菌、肺炎鏈球菌、沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸埃希菌、霍亂弧菌、腦膜炎奈瑟菌等細菌感染者

凝集實驗注意事項:

  不合宜人群:暫時不明
  檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個人衛(wèi)生。
  檢查時要求:積極配合醫(yī)生

凝集實驗檢查過程:

  1.玻片法常用于鑒定菌種及菌型,如葡萄球菌、肺炎鏈球菌、沙門菌屬、志賀菌屬、致病性大腸埃希菌、霍亂弧菌、腦膜炎奈瑟菌等的鑒定。
  (1)原理:用已知的診斷血清或血漿在玻片上與待檢菌及生理鹽水混合,若出現(xiàn)肉眼可見的特異性凝集塊,表示該菌為相應的細菌。
  (2)方法:取一潔凈載玻片,用接種環(huán)取待檢菌培養(yǎng)物,分別與診斷血清及生理鹽水混勻,上下?lián)u動玻片數(shù)次,l-3min后觀察結果。
  (3)結果判斷:陽性一待檢菌明顯凝集,對照菌均勻混濁。陰性一待檢菌及對照菌均勻混濁。自凝一測定菌、對照菌均凝集。
  (4)注意事項:某些細菌菌體表面常有一層表面抗原,如傷寒沙門菌的vi抗原及志賀菌屬的K抗原等。它能阻抑菌體抗原與抗血清的凝集,從而導致假陰性結果。此時應將菌懸液于100℃中煮沸1h,以破壞其表面抗原,然后再做試驗。
  2.試管法 此法可排除玻片法凝集試驗的非特異性凝集,是一種半定量凝集試驗。
  (1)方法:取小試管10支,第1管加入生理鹽水0.45ml,再加入0.05ml診斷血清混勻,其余各管均加生理鹽水0.25m|,然后從第1管中吸出0.25ml加入第2管中,混勻后再吸出0.25ml加入第3管,依次類推至第9管,從第9管吸出0.25ml棄去,第l0管不加抗血清為對照管。每管加待檢菌菌液0.25ml,充分震蕩混勻后,置37℃水箱浴中4h,再置4℃中過夜。
  (2)結果判斷:以血清最高稀釋度達到(++)凝集者(管內(nèi)液體澄清,部分凝集塊沉于管底)為該菌的凝集效價。若此效價所用原診斷血清效價一半以上者為陽性。
  (3)注意事項:腦膜炎奈瑟菌的菌液必須經(jīng)56℃30min滅活,以破壞自溶酶。若試驗出現(xiàn)低凝集結果時,應將該菌傳代數(shù)次后,再作試驗。

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