葉片水勢(shì)測(cè)定方法---小葉流法
Ⅰ、小液流法
一、目的
通過實(shí)驗(yàn)，掌握用小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)的原理和方法。
二、原理
水勢(shì)代表水的能量水平，水總是從水勢(shì)高處流向低處。水進(jìn)入植物體內(nèi)并分布到各組織器官中的快慢或難易由水勢(shì)差來決定，水勢(shì)越高，植物組織的吸水能力越差，而供給水能力越強(qiáng)。當(dāng)植物組織與一系列濃度遞增的溶液接觸后，如果植物組織水勢(shì)大于（或小于）外液的水勢(shì)，則組織失水（或吸水），使外液濃度變低（或變高），密度變?。ɑ蜃兇螅Ｈ绻参锝M織的水勢(shì)等于外液的水勢(shì)時(shí)，植物組織既不失水也不吸水，外液濃度不變。當(dāng)取浸泡過植物組織的溶液的小滴（亦稱小液流，為便于觀察應(yīng)先染色），分別放入原來濃度相同而未浸泡植物組織的溶液中部時(shí)，小液流就會(huì)因密度不同而發(fā)生上升或下沉或不動(dòng)的情況。小液流在其中不動(dòng)的溶液的水勢(shì)（該溶液為等滲濃度），即等于植物組織的水勢(shì)。
三、材料、設(shè)備及試劑
1. 材料：植物葉片；馬鈴薯塊莖等。
2. 儀器設(shè)備：試管；小瓶；小塞子；打孔器(直徑0.5㎝)；尖頭鑷子；移液管（1ml、5ml、
10ml）；注射針鉤頭滴管；刀片。
3. 試劑：1mol·L－1蔗糖液；甲烯藍(lán)粉。
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 系列糖濃度配制
1.1 取干燥潔凈試管6支，貼上標(biāo)簽，編號(hào)，用1mol·L－1蔗糖母液配成0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.30 mol·L－1濃度的糖液，各管總量為10ml，并塞上塞子（防止?jié)舛雀淖儯?，作為甲組。
1.2 另取干燥潔凈的小瓶6個(gè)，標(biāo)明0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol·L－1濃度,分別從甲組取相應(yīng)濃度糖液1ml盛于小瓶中，隨即塞上塞子，作為乙組。
2. 取樣及測(cè)定
2.1選取生長一致的葉片，用直徑為0.5cm的打孔器鉆取圓片，在玻璃皿內(nèi)混勻，然后用鑷子把圓片放進(jìn)乙組小瓶中，每瓶放15～20片，（若采用植物塊莖如馬鈴薯，先用打孔器鉆取圓條，然后切成約1mm厚圓片，每瓶放5片），立即塞緊塞子，放置40min左右 ，其間輕輕搖動(dòng)幾次，以加速平衡。
2.2 到預(yù)定時(shí)間后，各小瓶加入幾粒甲烯藍(lán)粉染色，搖勻，取6支干燥潔凈的注射針鉤頭滴管，分別從乙組中取出溶液，插入甲組原相應(yīng)濃度蔗糖溶液的中部，輕輕擠出鉤頭滴管內(nèi)的溶液，使成小液滴，并小心地抽出鉤頭滴管（注意勿攪動(dòng)溶液），注意觀察那些管的小液滴往上移動(dòng)，那些管的小液滴往下移動(dòng)，那一管的小液滴靜止不動(dòng)。如果某一管中的小液滴懸浮不動(dòng)，則說明該管溶液與小液流的密度相等，也即植物組織與該濃度糖液間未發(fā)生水分凈交換，植物組織的水勢(shì)等于該糖液的水勢(shì)，根據(jù)公式算出該糖液水勢(shì)也即得出植物組織水勢(shì) 。若前一濃度溶液小液流下沉，而后一濃度溶液中上浮，則組織的水勢(shì)值介于兩糖液水勢(shì)之間，可取平均值計(jì)算。
2.3 結(jié)果記錄
按下表記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果
系列濃度糖液的配置和實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表
需配糖液濃度（mol·L－1） 1 mol·L－1糖液（ml） 蒸餾水 (ml) 小液流移動(dòng)方向（上、下或不動(dòng)）
0.05 0.5 9.5
0.10 1.0 9.0
0.15 1.5 8.5
0.20 2.0 8.0
0.25 2.5 7.5
0.30 3.0 7.0
五、植物組織水勢(shì)值計(jì)算
將測(cè)得的等滲濃度值代入以下公式計(jì)算出植物組織的水勢(shì)：
公式中：ψW=ψл=－iCRT（MPa）
ψW —植物組織水勢(shì),單位：Mpa（兆帕）
ψл —溶液的滲透勢(shì)（即溶液的水勢(shì)）
C —等滲濃度（mol·L－1）
R —?dú)怏w常數(shù)（0.0083 L·MPa·mol－1·K－1）
T —熱力學(xué)溫度（273 + t℃）
i —解離系數(shù)（蔗糖 =1；CaCl2 =2.60）
六、注意事項(xiàng)
1. 配制糖液濃度要準(zhǔn)確，并充分搖勻。
2. 取樣時(shí)選材要一致。
3. 打孔時(shí)要避開大葉脈。
4. 加甲烯藍(lán)要適量，過多會(huì)影響溶液濃度，過少則很難識(shí)別小液流移動(dòng)方向。
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企業(yè)風(fēng)采
