異常血紅蛋白(abnormal hemoglobin)篩查的方法和注意事項(xiàng)
1. 浸膜:將醋酸纖維素薄膜膜面向下放入浸膜液中,浸透后用眼科鑷子壓入液面底部。
2. 采血:碘伏消毒耳垂部,用一次性采血針采血,并將血液吸在兩次對(duì)折的濾紙尖部。
3. 加樣:將浸泡好的醋酸纖維素薄膜膜面向上放在濾紙上,用濾紙吸去多余的液體,在距一側(cè)1.5cm處用沾血的濾紙涂圓點(diǎn)狀(直徑約0.2cm)或線狀。
4. 電泳:將加好樣的醋酸纖維素薄膜膜面向下放入電泳槽中的緩沖液紗布上,加樣端放在負(fù)極,靜置2分鐘后開啟電源,調(diào)電壓200伏,電泳40分鐘。
5. 電泳結(jié)束后,關(guān)掉電源,觀察電泳圖譜,并記錄紅色區(qū)帶(幾條)及分布(位置)情況。
6. 染色: 將醋酸纖維素薄膜放入染色液中2分鐘,然后轉(zhuǎn)入漂洗液中洗至背底呈白色,再觀察結(jié)果。
電泳對(duì)比圖譜
含異常血紅蛋白的樣品:應(yīng)在未染色前觀察,除正常成分外,在任何位置出現(xiàn)的不經(jīng)染色的紅色區(qū)帶,均可記為有異常血紅蛋白存在。異常血紅蛋白常以HbA為標(biāo)準(zhǔn),分為快泳血紅蛋白和慢泳血紅蛋白。
[注意事項(xiàng)]
1. 醋酸纖維素膜一定要浸透(無(wú)白色斑點(diǎn)),加樣前從浸膜液中取出,既要吸去多余的液體還不能使膜太干,否則都會(huì)影響電泳結(jié)果。
2. 加樣時(shí)注意要加在醋酸纖維素的膜面,電泳時(shí)也要膜面向下放到電泳槽中的緩沖液紗布上。