凝血分析儀使用經驗!
隨著血栓/止血檢測在臨床上的廣泛應用,其為臨床疾病的診斷、治療、預防與監(jiān)測提供了許多富有參考價值的依據,得到了臨床醫(yī)生的認可和歡迎,使血栓/止血的檢測無論是在科研上還是在臨床常規(guī)應用上都得到了日新月異的發(fā)展。凝血儀的廣泛使用緊隨著血栓/止血檢測的發(fā)展步伐,從十幾年前的僅有凝固法檢測的半自動凝血儀,到如今的具有凝固法、發(fā)色底物法、免疫法的全自動各系列凝血儀,使血栓/止血的檢測達到了快速、簡便、準確的境界,有關凝血、纖溶、抗凝系統(tǒng)的相關檢測也可通過一臺儀器檢測出來。
我實驗購進一臺Sysmex CA-1500 全自動凝血分析儀,在使用的過程當中積累了一定的經驗,有如下一些體會,希望與廣大的凝血儀用戶特別是Sysmex CA 系列凝血儀用戶共同探討。
1. Sysmex CA-1500有先進的方法學:集凝固法、發(fā)色底物法、免疫法三種方法于一體。
(1)凝固法:應用散射光比濁原理,檢測血液凝固反應過程中散射光強度的變化,從而檢測與血液凝固相關的凝血因子的含量。凝固法很早就應用于血凝的檢測,但Sysmex CA-1500使凝固法得到了發(fā)展,即檢測不同標本的基礎散射光強度定為bH0%,然后分別測定50%和100%,從而繪出曲線,這樣就使溶血標本和乳糜血標本的凝血項目檢測成為可能,我們在臨床標本的檢測中也印證了Sysmex CA-1500的較強抗干擾能力。
(2)發(fā)色底物法:大部分抗凝系統(tǒng)的檢測應用了發(fā)色底物法,我室應用發(fā)色底物檢測通道批量檢測過AT-III、PLG、PC、PS諸項指標,結果顯示發(fā)色底物通道具有良好的線性和重復性,而且檢測時間較快,標準曲線設置較簡單,操作簡便,適用于臨床常規(guī)檢測。
(3)免疫法:Sysmex CA-1500創(chuàng)造性地將免疫比濁法引入到凝血儀中,使許多有關血栓/止血的分子標志物的檢測成為可能,特別是在D-Dimer 的常規(guī)檢測方面提供了既快速又準確的定量檢測方法,可以稱為凝血儀的一次革命。
D-Dimer是纖溶酶水解交聯(lián)纖維蛋白的產物,是具有共價鍵的D片段,是血栓形成的分子標志物,在DIC、DVT、PE等許多疾病的診斷和治療當中有重要意義,也得到了臨床醫(yī)生的認可。D-Dimer的實驗檢測方法有定性和定量兩類,定量檢測又有ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)、免疫比濁法和半定量的讀卡法。因臨床診斷和治療的需要,定量法為首選,且需要快速簡便的方法,ELISA法雖準確,但不能及時檢測,不適用于臨床即刻檢測的需要。Sysmex CA-1500采用的免疫比濁法測定D-Dimer具備了免疫法的定量和快速檢測的特點,為D-Dimer的檢測開辟了新天地。
CA-1500(含其他有免疫方法的CA系列凝血儀)采用的免疫比濁測定法,以碘鎢燈做光源,在405nm、575 nm、800 nm處產生濾過光,其通過含有標本與膠乳試劑反應的試管時測得反應的濁度OD值,結合反應的曲線,對照標準曲線可計算出標本中抗原的濃度。在具體的檢測當中,我們先后應用過biopool公司的Auto-Dimer和DADE BEHRING公司的D-Dimer PLUS 檢測試劑盒,檢測的精度、準確度、靈敏度逐步提高,前者試劑檢測的最大值為3200ug/l,而后者可達到9500 ug/l,大大提高了檢測的線性范圍,而且在對高濃度抗原標本檢測中,為了避免其產生的非線性反應曲線和假性低值,CA-1500通過對起點和線性范圍內任一點的ΔOD/分鐘的變化監(jiān)測進行有效防范,如果測得值在鑒別限以上者作為抗原過剩報警(Error 8),并自動重稀釋樣本進行復檢,這種功能在實際工作中十分重要,把由于反應線性錯誤造成的假陽性結果甄別出來,使結果更準確可靠,也使CA-1500的免疫比濁法更加完善。
2.CA-1500的操作界面簡便,完全任選式分析模式。
不論多么先進的機器,如果操作起來特別復雜,操作人員需經過煩瑣的培訓才能使用,從應用的角度講,都不能說是一種“好”機器。CA-1500卻充分地為使用者著想,它的操作界面非常簡單,每日的工作菜單完全自選式,操作人員所要做的就是把離心好的標本編號,打開工作菜單,設定好實驗項目,按“start”即可,舉手之勞,簡捷易行,而且檢測速度較快(180tests/小時),從操作的角度CA-1500是個很完美的機器。
3.CA-1500有先進的試劑管理系統(tǒng)和可自行編輯的測試程序
所有的設立在操作程序中的試劑都有一個試劑位置,每種試劑的剩余量均顯示于試劑管理的界面上,試劑液面敏感度可以根據使用者需要設立,而且CA-1500為使用者提供了一個真正開放的試劑系統(tǒng),可以根據使用實際的不同更改測試程序,而且它為使用者提供了一定的科研開發(fā)空間,如果要開發(fā)新項目也可自行設立程序,我室就根據已有的發(fā)色底物測定試劑說明所設程序,對機器已有的AT-III、PLG、PC、PS測定程序進行了更改并測定,結果令人滿意。
4.CA-1500有廣泛的質控文件
血栓/止血的檢測已逐步建立了室內和室間質控體系,對每個實驗室來說,室內質控是確保實驗質量的基礎,CA-1500為操作者提供了足夠豐富的質控文件,對每個質控結果均有記錄,并自動畫出曲線且計算出相應的統(tǒng)計結果,使操作者隨時對每日的結果有總體的評介,并能根據質控曲線找出存在的問題。
5.CA-1500性能較穩(wěn)定,故障率低,有全面的報警系統(tǒng)
在使用的過程中,幾乎最細小的差錯,系統(tǒng)也會報警提示操作者,這為操作者提供了找出差錯的便捷途徑。CA-1500的性能較穩(wěn)定,結果重復性好,機器的故障率不高,機械原理不復雜,簡單的故障可自行解決。
綜上所述,從設立的方法學、操作的便捷程度、機器的性能等方面來講,CA-1500都稱得上是一個較適用于臨床的血凝檢測儀器。如果能進一步提高檢測速度,有更多的經濟實用的免疫比濁法檢測項目的試劑開發(fā)并應用到臨床,進一步提高免疫比濁法檢測的靈敏度和分析范圍,相信CA-1500和Sysmex其他型號的凝血儀將會成為更多用戶的首選。