動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)入門(mén)(四)
適用于各種樣品類型的比色皿
大多數(shù)光散射系統(tǒng)在批量樣品分析期間使用各種比色皿池或比色皿來(lái)盛放樣品。它們通常是塑料(通常是聚苯乙烯)、玻璃或石英材質(zhì)的,但大小各不相同。樣品的最小用量取決于光學(xué)設(shè)置,通常為2-3ml。不過(guò),如果不考慮任何樣品回收要求,也有一些系統(tǒng)測(cè)量只需要2μl的樣品用量。
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一次性塑料比色皿無(wú)需清洗,消除了交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),特別適用于盛放有毒材料;有些比色皿只有50 μL大小。采用比色皿可以避免產(chǎn)生‘非比色皿’系統(tǒng)(即把樣品直接放在玻璃片上進(jìn)行測(cè)量)因清洗不徹底而導(dǎo)致測(cè)量不準(zhǔn)確的問(wèn)題。石英比色皿具有更佳的測(cè)量質(zhì)量,尤其是用于低濃度或小粒徑樣品時(shí),這是因?yàn)槭⒉牧暇哂袃?yōu)異的光學(xué)特性和抗劃傷性。
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減輕分析負(fù)擔(dān)
光散射通常只是許多研究人員在實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)使用的多種技術(shù)之一。儀器操作者可能不是光散射方面的專家,因而儀器操作的簡(jiǎn)便性是很有幫助的。
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一些DLS系統(tǒng)在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中即對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估,剔除因大顆粒存在而被污染的結(jié)果。這類些系統(tǒng)有助于提高樣品制備的速度和容許范圍。粒徑大于10微米的顆粒主要發(fā)生向前散射,因此含背散射檢測(cè)器的儀器對(duì)這些顆粒的存在不太敏感。測(cè)量濃度范圍寬的系統(tǒng)盡可能降低了樣品稀釋的需求,進(jìn)一步提高了測(cè)量效率。
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大多數(shù)現(xiàn)代化測(cè)量系統(tǒng)在數(shù)據(jù)采集過(guò)程中都無(wú)需操作員干預(yù),從而減少了分析師的工作量,并提高測(cè)量的可重復(fù)性。但是有些比較復(fù)雜的樣本可能需要采用特殊方法進(jìn)行測(cè)量,因此應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)中包含這些特殊方法,從而確保應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)化。
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雖然自動(dòng)測(cè)量現(xiàn)在已很普遍,但在內(nèi)置數(shù)據(jù)分析支持程度方面,不同儀器之間的差異很大。如果是給非專業(yè)人員使用的光散射測(cè)量系統(tǒng),那么含有內(nèi)置數(shù)據(jù)分析和專家意見(jiàn)的先進(jìn)軟件將極富價(jià)值,就好像在電話另一端有一位可靠的、活生生的專家一樣。
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總結(jié)
DLS是一項(xiàng)比較成熟的技術(shù),可為各種類型的樣品進(jìn)行粒徑和分子尺寸測(cè)量。因此,在選擇儀器時(shí),必須將系統(tǒng)能力與用戶要求緊密聯(lián)系起來(lái),使兩者相匹配。光散射系統(tǒng)在測(cè)量粒徑的同時(shí),還可以測(cè)量分子量、蛋白質(zhì)電荷和Zeta電位,甚至還能具有微流變學(xué)測(cè)量功能。
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不同系統(tǒng)之間的靈敏度有很大差別,如同在高濃度下也能進(jìn)行測(cè)量一樣,也可對(duì)各種大小的顆?;蚍肿舆M(jìn)行有效的測(cè)量。與那些90o度探測(cè)器相比,背散射儀器具有很實(shí)際的優(yōu)勢(shì)。
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除了性能以外,還有其它因素也會(huì)影響儀器使用壽命期內(nèi)的價(jià)值,包括易于清潔;能獲得的支持以及友好的用戶軟件界面。無(wú)論是什么規(guī)格的儀器,最好的建議是在購(gòu)買前進(jìn)行測(cè)試,看看你能否輕松得到有用的數(shù)據(jù)。DLS問(wèn)世已經(jīng)多年,因此不論你的用途是什么,你都可以期望擁有一套有使用針對(duì)性的、富有成效并且易于操作的測(cè)量系統(tǒng)。