不同因素對(duì)細(xì)胞融合率的影響實(shí)驗(yàn)的目的意義
細(xì)胞融合的影響因素
一、影響動(dòng)物細(xì)胞融合的因素
在動(dòng)物細(xì)胞的融合過程中,細(xì)胞融合率不僅會(huì)受到促融劑的影響,而且離子強(qiáng)度、離子種類、溫度、PH、細(xì)胞性質(zhì)等均會(huì)對(duì)細(xì)胞融合率產(chǎn)生影響。
1、細(xì)胞融合時(shí),溫度和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)需要適宜。
2、細(xì)胞融合過程中,一般會(huì)消耗大量的氧氣,缺氧時(shí)不融合。
3、某些細(xì)胞融合時(shí)需要Ca2+,不然不融合。
4、PH為7.4-7.8為Z合適的酸堿度,不在該范圍內(nèi),不適合融合。
5、親本細(xì)胞表面性質(zhì)對(duì)細(xì)胞融合率有比較大的影響,如果表面光滑,那么融合比較難,如果表面覆蓋絨毛而不規(guī)則,那么融合比較容易。
6、不同的細(xì)胞種類,融合效果也會(huì)有所差異。例如淋巴細(xì)胞、血細(xì)胞幾乎不融合,腹水癌融合比較容易。
二、影響植物細(xì)胞融合的因素
植物原生質(zhì)體融合不存在種屬特異性,和其自身種屬不相關(guān)聯(lián),因此,只有外界條件影響融合效率。
1、將少量CaCI2加入到融合液中,會(huì)對(duì)電導(dǎo)率起到一定的維持作用,從而保護(hù)細(xì)胞。除此之外融合率會(huì)受到電脈沖大小、處理時(shí)間長短、以及交變電流的強(qiáng)弱的影響。
2、在融合前,將原生質(zhì)用混合鹽溶液進(jìn)行處理,和將伴刀豆蛋白、二甲基亞砜等添加進(jìn)促融劑中,能夠使得融合率提高。
3、當(dāng)電場誘導(dǎo)融合時(shí),原生質(zhì)體密度會(huì)對(duì)融合率產(chǎn)生影響。2-8×104個(gè)/ml為Z適宜的密度,如果密度大于106個(gè)/ml,那么會(huì)融合成團(tuán);如果密度小于104個(gè)/ml,那么會(huì)得到較低的融合效率。
4、作用時(shí)間在PEG誘導(dǎo)融合中起到關(guān)鍵性作用,特別重要的是高Ca2+和PH溶液處理時(shí)間長短。如果時(shí)間過短,那么不融合;如果時(shí)間過長,那么會(huì)嚴(yán)重?fù)p傷原生質(zhì)體,大大降低融合效率。
5、融合效率也會(huì)受到PEG規(guī)格和純度的影響。