T/NXFSA 001-2019
枸杞中12種農藥殘留快速檢測方法 膠體金免疫層析法

Colloidal gold immunochromatography method for rapid detection of 12 kinds of pesticide residues in wolfberry

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標準號

T/NXFSA 001-2019

發(fā)布

2019年

總頁數

7頁

發(fā)布單位

中國團體標準

當前最新

T/NXFSA 001-2019

 

 

引用標準

GB/T 1.1-2009

 

 

本體

農藥殘留 枸杞

適用范圍

枸杞中12種農藥殘留快速檢測方法                          膠體金免疫層析法 1　范圍 本標準規(guī)定了枸杞鮮果、干果中啶蟲脒、吡蟲啉、毒死蜱、多菌靈、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲環(huán)唑、克百威、噠螨靈、甲基對硫磷、炔螨特殘留的膠體金免疫層析快速檢測方法。 本標準適用于枸杞鮮果和干果中啶蟲脒、吡蟲啉、毒死蜱、多菌靈、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲環(huán)唑、克百威、噠螨靈、甲基對硫磷、炔螨特12種農藥殘留的快速檢測。 2　原理 應用膠體金競爭抑制免疫層析法的原理，樣品中殘留的待測物與檢測線上的待測物抗原共同競爭膠體金標記的特異性抗體，通過檢測線與控制線顏色深淺比較，對樣品中待測物進行定性半定量判定。 3　試劑與材料 3.1　膠體金免疫層析試劑盒 農藥殘留膠體金免疫層析檢測試劑盒，含膠體金試紙條及配套試劑。 3.2　提取液 3.2.1 水溶性農藥提取液：啶蟲脒、吡蟲啉、毒死蜱、多菌靈、克百威、噠螨靈、甲基對硫磷、炔螨特，應用純水或蒸餾水為提取液。 3.2.2不溶或難于水農藥提取液：氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲環(huán)唑，應用體積比為1:1水與無水乙醇（分析純）混合液為提取液。 4　儀器設備 4.1　電子天平（感量0.1g）。 4.2　溫育器：40℃±2℃（可選）。 4.3　便攜式讀數儀。測量波長：525nm。 4.4　移液器：300 μL。 5　測定步驟 5.1　樣品前處理 選取代表性枸杞樣品，稱取20g ± 1.0 g整粒樣品，放入約120mL帶蓋容器中，加入提取液。 枸杞干果，直接加入80mL提取液；枸杞鮮果，應搗碎后加入80mL提取液。擰緊容器蓋，充分震蕩混勻3min，再浸泡5min～10min后搖勻，用移液器移取上清液3-5ml至5mL離心管中，即為待測液。 5.2　測定 5.2.1　檢測卡法測定 取出檢測卡，水平放置，用吸管吸取一定量待測液，滴2～3滴到加樣孔，滴加時須緩慢逐滴加入。在滴加樣品后應在5min～10min內讀結果，10min后結果無效。 5.2.2　試紙條與金標微孔（試劑瓶）法測定 吸取制備好的樣品待測液9～10滴（約300μL）于含膠體金的微孔或試劑瓶中，并上下抽吸5～10次混勻或搖晃試劑瓶6～8次充分溶解混勻。于20℃～40℃開始第一次溫育2分鐘；取出試紙筒中的試紙條，將測試條插入微孔或試劑瓶中；于20℃～40℃開始第二次溫育5分鐘；從微孔或試劑瓶中取出測試條，輕輕刮去測試條下端的吸水海綿，進行結果判讀。. 6　結果判讀 6.1　目視判定 6.1.1 通過對比控制線（C線）和測試線（T線）的顏色深淺來進行結果判定。由于長時間放置會引起測試線顏色的變化，應在5 min內進行結果判讀。 6.1.2 首先查看控制線是否有顏色顯現(xiàn)。如果不顯色，檢測無效，需另取測試條進行測試。 6.1.3 控制線正常顯色的情況下，按表1進行結果判斷，示意圖見圖1。 表1 結果判斷依據 測試線（T線）與控制線（C線）顏色深淺比較　結果判斷　結果分析 T線顏色深于C線　陰性　說明被測樣品中未檢出被測農藥 T線顏色淺于C線或T線不顯色　陽性　說明檢測樣品中檢出被測農藥 注：“空白”系未滴加任何試劑的全新測試條圖樣。 圖1 目視判定示意圖 6.2　讀數儀判定 6.2.1如果使用讀數儀進行結果判斷，應于反應完成5min內讀取結果。 6.2.2 應按照讀數儀的使用說明書讀數。 6.2.3 陰性結果R≥1.0，陽性結果 R＜1.0。計算方式：峰面積分析，計算檢測線峰面積/控制線峰面積比值。 7　檢出限 檢出限應符合表2規(guī)定。 表2 膠體金免疫層析檢測方法檢出限 檢測農藥名稱　檢出限（mg/kg）　檢測農藥名稱　檢出限（mg/kg） 啶蟲脒　2.0　吡蟲啉　1.0 毒死蜱　0.1　多菌靈　1.0 氯氰菊酯　2.0　氯氟氰菊酯　0.2 氰戊菊酯　0.2　苯醚甲環(huán)唑　0.1 克百威　0.02　噠螨靈　0.5 甲基對硫磷　0.02　炔螨特　3.0 8　確證實驗 如被測樣品中試紙條檢測結果為陽性時，應采用國標方法進行確證檢測。 9　其它 本方法的測定步驟和結果判讀也可以根據廠家試劑盒的說明書進行。

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