SN/T 5173-2021
國境口岸蜱傳腹地病毒實(shí)時熒光RT-PCR檢測方法

Real-time fluorescence RT-PCR detection method for tick-borne hinterland viruses at border ports

適用范圍: 本文件規(guī)定了國境口岸蜱傳腹地病毒實(shí)時熒光 RT-PCR 檢測方法，包括樣本前處理、檢測程序、方法、結(jié)果判定及報(bào)告。本文件適用于檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)對人及蜱攜帶腹地病毒的核酸檢測。

術(shù)語	描述
腹地病毒 Heartland virus	單股負(fù)鏈節(jié)段性 RNA 病毒，屬于布尼亞病毒科的白蛉病毒屬，有 S、M 和 L 片段。
逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) reverse transcription polymerase chain reaction	將 RNA 逆轉(zhuǎn)錄（RT）和 cDNA 聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。
實(shí)時熒光 RT-PCR real-time fluorescence RT-PCR	在常規(guī) RT-PCR 的基礎(chǔ)上，加入一條特異性的熒光探針。
Ct 值 Cycle threshold	每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。
DEPC diethyl pyrocarbonate	焦碳酸乙二酯，用于制備無 RNA 酶的水溶液。

-70 ℃超低溫冰箱	用于保存樣本及試劑。
二級生物安全柜	用于在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室中操作感染性材料。
臺式離心機(jī)	用于分離樣本中的成分。
漩渦振蕩器	用于混合液體樣本。
熒光定量 PCR 儀	用于進(jìn)行實(shí)時熒光 RT-PCR 檢測。
高壓滅菌器	用于滅菌操作，保證實(shí)驗(yàn)安全。