GB/T 23195-2008
蜂花粉中過氧化氫酶的測定方法 紫外分光光度法
Determination method of catalase in bee pollen by ultraviolet spectrophotometry
GBT23195-2008, GB23195-2008
- 標(biāo)準(zhǔn)號
- GB/T 23195-2008
- 別名
- GBT23195-2008, GB23195-2008
- 發(fā)布
- 2009年
- 總頁數(shù)
- 5頁
- 發(fā)布單位
- 國家質(zhì)檢總局
- 當(dāng)前最新
- GB/T 23195-2008
- 適用范圍
- 液吸光度在一定范圍內(nèi)隨反應(yīng)時間變化，使用的試劑為去離子水。4.1 pH緩沖液：準(zhǔn)確稱取0.5 g二鈉EDTA，溶解于500 mL去離子水中，混勻；準(zhǔn)確稱取0.1 g KCl，加入，量取5 mL NaOH溶液，加至150 mL，定容至刻度，混勻。 4.2 過氧化氫溶液：從中準(zhǔn)確量取10.0 mL，進行混合，隨后準(zhǔn)確量取0.07 mL的過氧化氫溶液以備分析使用。 4.3 液氮。 5 儀器設(shè)備： 5.1 紫外分光光度計； 5.2 冷凍離心機； 5.3 恒溫水浴鍋； 5.4 酸度計； 5.5 分析天平（感量為0.1 mg）； 5.6 移液槍（100 μL和5000 μL）。 6 待測液的制備：稱取1 g樣品，精確到1 mg，置于已用適量液氮預(yù)冷的研缽中，邊加液氮邊研磨。待樣品充分磨碎后，放置至研缽解凍，升溫后加入約10 mL新鮮配制的磷酸緩沖液（4.1）溶解，轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，并用磷酸緩沖液沖洗研缽數(shù)次，合并洗液并定容至刻度。混合均勻后，將容量瓶置于冰箱中靜置30分鐘，取上清液，在低溫離心機（4°C，12000 r/min）條件下離心15分鐘，取澄清液即得待測液。 7 分析步驟： 7.1 紫外分光光度計參數(shù)： - 方式：時間掃描； - 波長：240 nm； - 測定時間：120 s； - 讀數(shù)間隔：5 s。 7.2 將樣液及過氧化氫溶液（4.2）分別置于40°C恒溫水浴鍋中加熱10分鐘，準(zhǔn)確吸取樣液0.1 mL于石英比色皿中，將石英比色皿放回槽中（在放置石英比色皿前儀器已進行零點校正），再吸取2.9 mL過氧化氫溶液（4.2），加入樣液中，混合均勻，立即開始讀數(shù)。 7.3 從0s~90s中截取線性較好的1分鐘數(shù)據(jù)，計算其吸光度差值。 8 計算與表述： 在1分鐘內(nèi)，過氧化氫在240 nm波長下吸光度減少0.01的酶量為1個酶活單位（U）。過氧化氫酶活性（U/g）按式（1）計算： \[ U = \frac{A_{min}}{V} \] 式中： - A為結(jié)果中選取的1分鐘吸光度差值； - V為樣液總體積，單位為毫升（mL）； - 0.01為在240 nm波長下吸光度每下降0.01為1個酶活單位（U）； - t為1分鐘； - V_sample為測定用樣液體積，單位為毫升（mL）； - m為樣品質(zhì)量，單位為克（g）。 計算結(jié)果表示到整數(shù)位，報告結(jié)果為平行測定結(jié)果的算術(shù)均值。 9 允許差：同一實驗室平行測定或重復(fù)測定的結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過10%。
| 術(shù)語 | 描述 |
|---|---|
| 紫外分光光度法 Ultraviolet Spectrophotometry | 通過測量溶液在特定波長下的吸光度來定量分析的方法。 |
GB/T 23195-2008 中提到的儀器設(shè)備
專題
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