同系層析在核酸分析中,將樣品經(jīng)核酸酶部分裂解成不同長(zhǎng)度的核苷酸片段,用同位素標(biāo)記后,在DEAE纖維素薄層上分離,用含有未標(biāo)記的相同的核苷酸片段作展層溶劑,這樣,未標(biāo)記的核苷酸把標(biāo)記過(guò)的核苷酸推進(jìn),使按分子量大小不同把標(biāo)記核苷酸片段,按由小到大的次序排列,達(dá)到分離的目的。于是把這種層析法稱為同系層析。同系層析和電泳相結(jié)合曾用于寡核苷酸的順序分析。...
二、紙層析分離結(jié)果分析:??????? 紙層析分離結(jié)果分析包括定性分析和定量分析,常與離心機(jī)分離技術(shù)結(jié)合使用。? 1、定性分析:?????? 層析后的斑點(diǎn)顯示出來(lái)后,計(jì)算出各斑點(diǎn)的遷移率,即可以對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析。? 2、定量分析:(1)剪洗比色法:??????? 將斑點(diǎn)剪下,用適當(dāng)的溶劑洗脫后,通過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行比色定量。...
在核酸分析中,將樣品經(jīng)核酸酶部分裂解成不同長(zhǎng)度的核苷酸片段,用同位素標(biāo)記后,在DEAE纖維素薄層上分離,用含有未標(biāo)記的相同的核苷酸片段作展層溶劑,這樣,未標(biāo)記的核苷酸把標(biāo)記過(guò)的核苷酸推進(jìn),使按分子量大小不同把標(biāo)記核苷酸片段,按由小到大的次序排列,達(dá)到分離的目的。于是把這種層析法稱為同系層析。同系層析和電泳相結(jié)合曾用于寡核苷酸的順序分析。 ...
用 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分離含有?32P 標(biāo)記的蛋白質(zhì)樣品。2. 電泳后,干膠,四周邊緣用熒光墨水標(biāo)記,對(duì) X 射線膠片曝光(放射自顯影)。3. 通過(guò)與膠片上的凝膠四周熒光標(biāo)記的位置的比對(duì)確定蛋白質(zhì)的位置。將膠片與干膠釘在一起,膠片朝下放入一個(gè)光盒里。在膠的背面用軟鉛筆或圓珠筆(不要用標(biāo)簽筆)標(biāo)記出 32P 標(biāo)記蛋白質(zhì)條帶的位置。4....
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