分光光度法定量方法
利用分光光度法對物質(zhì)進行定量測定,主要有以下幾種方法:
1、標(biāo)準(zhǔn)管法
將待測溶液與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同條件下分別測定A值,然后按下式求得待測溶液中物質(zhì)的含量。
CT=(AT/AS)*CS
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
先配制一系列濃度由小到大的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別測定出它們的A值,以A值為橫坐標(biāo),濃度為縱坐標(biāo),作標(biāo)準(zhǔn)曲線(A~c工作曲線),可以求出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程。在測定待測溶液時,操作條件應(yīng)與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時相同,以待測液的A值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出(得到)該樣品的相應(yīng)濃度。
3、吸光系數(shù)法
當(dāng)某物質(zhì)溶液的濃度為1mol/L,厚度為1cm時,溶液對某波長的吸光度稱為該物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù),以ε表示。ε值可通過實驗測得,也可由手冊中查出。例如亞鐵氮二雜菲配合物的ε值 等于11000 L/cm·mol
已知某物質(zhì)ε值,只要測出其A值再根據(jù)下式便可求得樣品的濃度:c=A/ε。
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